ニューテック社の全自動核酸抽出・検出装置

5つの強み：
● 核酸抽出・精製ステップを備えた装置
● 超音波抽出モジュールを備えた機器
● 全自動で構成された装置
● 可変温度増幅器を備えた機器
● 完全密閉型試薬キットで構成された装置

1.核酸検出試薬は抽出して精製する必要がありますか?
核酸検出の原理は次のとおりです。プライマーの作用下で、DNAポリメラーゼを使用してテンプレートDNA/RNA（NAの逆転写が必要）の連鎖反応増幅を実行し、その後放出される蛍光シグナルの量を検出して決定します。サンプルに検出対象の病原体の核酸 (DNA/RNA) が含まれているかどうか。

1) 抽出または精製されていないサンプルには、最終結果に影響を与える多くの成分が含まれている可能性があります: ヌクレアーゼ (標的核酸を溶解し、偽陰性を引き起こす可能性がある)、プロテアーゼ (DNA ポリメラーゼを減少させ、偽陰性を引き起こす可能性がある)、重金属塩 (シンターゼの不活化を引き起こし、偽陽性を引き起こす)、酸性またはアルカリ性すぎる PH (反応の失敗を引き起こす可能性がある)、不完全 RNA (偽陰性の逆転写失敗を引き起こす)。

2) 一部のサンプルは直接増幅することが困難です: グラム陽性菌や一部の寄生虫は、細胞壁やその他の構造が厚いため、核酸抽出および精製プロセスを経ないと、抽出フリーキットはそのようなサンプルに対して失敗する可能性があります。サンプル。

したがって、核酸抽出ステップを備えた検査キットまたは機器を選択することをお勧めします。

2. 化学的抽出または物理的超音波破砕抽出?
一般的に、化学抽出はほとんどの前処理と精製に適用できます。しかし、壁の厚いグラム陽性菌や一部の寄生虫では、化学的抽出では効果的な核酸テンプレートを取得できず、偽陰性検出が生じる場合もあります。また、化学抽出では強い薬剤を使用することが多く、溶出が不十分だと反応系に強アルカリが混入しやすく、結果が不正確になります。

超音波断片化は物理的破砕を使用します。これは人間向けの POCT 分野の大手企業である GeneXpert によって成功裏に使用されており、一部の複雑なサンプル (結核菌など) の核酸抽出において絶対的な利点があります。

したがって、核酸抽出ステップを備えた検査キットまたは機器を選択することをお勧めします。超音波抽出モジュールがあれば最適です。

3. 手動、半自動、全自動?
これは人件費と作業効率の問題です。現在、動物病院ではスタッフが不足しており、核酸の抽出・検出は一定の技術と経験を必要とする作業となっております。全自動の核酸抽出および検出装置が最適な選択であることに疑いの余地はありません。

4. 一定温度増幅または可変温度増幅?
増幅反応は核酸検出のリンクであり、このリンクに関与する専門技術は複雑です。大まかに言えば、酵素は核酸を増幅するために使用されます。増幅プロセスでは、増幅された蛍光シグナルまたは埋め込まれた蛍光シグナルが検出されます。一般的に言えば、蛍光シグナルが現れるのが早ければ早いほど、サンプルに含まれる標的遺伝子の含有量が多くなります。

定温増幅は固定温度での核酸増幅ですが、可変温度増幅は厳密に変性-アニーリング-伸長に従った循環増幅です。一定温度増幅時間は実行されますが、可変温度増幅時間は機器の温度上昇率と下降率に大きく影響されます (現在、多くのメーカーは約 30 分で 40 サイクルの増幅を実行できます)。

実験室の条件が良好で、ゾーニングが厳密であれば、両者の精度の差は大きくないと言えるでしょう。しかし、可変温度増幅では、比較的短い時間でより多くの核酸産物が合成されます。厳格なゾーニングや専門の訓練を受けた担当者のいない研究室では、核酸エアロゾル漏洩のリスクがより大きくなり、漏洩が一度起こると偽陽性が発生し、これを排除するのは非常に困難です。

さらに、サンプルが複雑な場合、定温増幅は非特異的増幅を起こしやすくなります (相対反応温度が低く、伸長温度が高いほどプライマー結合特異性が高くなります)。

現在の技術に関する限り、可変温度増幅の方が信頼性が高くなります。

5. 核酸増幅産物の漏洩リスクを回避するにはどうすればよいですか?
現在、多くのメーカーが核酸反応チューブとしてグランドタイプのPCRチューブを選択していますが、これは摩擦により密閉されており、可変温度PCR増幅における温度変性における温度変性は90度に達します。
摂氏 。熱による膨張と冷気による収縮の繰り返しは PCR チューブの密封にとって大きな課題であり、グランドタイプの PCR チューブは比較的漏れが発生しやすいです。

反応生成物の漏洩を避けるため、完全に密閉したキット/チューブで反応を行うことが好ましい。核酸の抽出と検出のための完全に密閉されたキットが開発できれば完璧です。

したがって、New Tech の新しい全自動核酸抽出および検出装置には、上記の 5 つの最適な選択肢があります。